货号：B014/B015

规格：50次/100次

产品简介及说明：

1. 本组蛋白提取试剂盒是由一套完整的优化Buffer和试剂组成，用于从哺乳动物细胞或组织中提取总组蛋白 (H2A、H2B、H3和H4)，整个流程可在80min内完成，且可保持组蛋白提取物中的翻译后修饰完整性，因此提取物可用于各种翻译后修饰检测及应用，包括组蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化、SUMO化和ADP-核糖基化作用研究。

2. 本试剂盒所提取组蛋白可保留所有相关翻译后修饰，包括甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化、SUMO化、核糖基化以及Neddylation等翻译后修饰。

3. 建议每次从10⁷~10⁸个细胞/0.1g组织中提取组蛋白样品。

4. 无需超速离心。

5. 整个实验流程约需80min。

试剂盒清单：

保存条件：Adjust Buffer -20°C保存，有效期12个月。

使用说明：

根据样品类型，本试剂盒分为以下A&B两种样品处理方法。

A. 组织中提取

1. 收集0.1g组织，加入1.0mL Lysis Buffer 1及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择)，冰上用组织研磨器或匀浆管研磨。

2. 将匀浆后样品转移至1.5mL离心管中，11000rpm 5min，吸弃上清保留沉淀。

3. 至步骤2。

B. 细胞中提取

1. 收集约10⁷~10⁸个细胞，3000rpm 5min(悬浮细胞直接离心，贴壁细胞使用细胞刮刀或胰蛋白酶消化离心收集均可。注意用预冷PBS清洗残留培养基和胰蛋白酶等)，吸弃上清。

2. 至步骤1。

步骤1：加1.0mL Lysis Buffer 1及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择)，冰上孵育30min(每10min用移液枪吹打一次)，4°C 11000rpm离心5min，轻轻吸弃上清。

步骤2：于上述步骤离心管中加入200μL Lysis Buffer 2，置于冰上30min(每10min涡旋一次)，4°C 11000rpm离心5min，吸取上清于一新离心管中。

步骤3：加入40μL Balance Buffer于上述步骤离心管中，用移液枪轻轻吹匀。

步骤4：使用BCA定量试剂盒或微量BCA定量试剂盒定量，可选用本公司《BCA蛋白浓度测定试剂盒》(货号B012)或《BCA微量蛋白浓度测定试剂盒》(货号B011)。

步骤5：于步骤3离心管中加入2.4μL Adjust Buffer，轻轻吹匀，并应用于下游研究。

注意事项：

1. 本试剂盒需根据实验需求，自备全酶抑制剂或磷酸酶抑制剂等于样品处理时加入。

2. Adjust Buffer需保存于-20°C。

3. 如溶液有析出，请于37°C水浴溶解后使用。

4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

5. 使用本试剂盒过程中，请于蛋白定量前加入Adjust Buffer。

6. 蛋白定量完成后，如需开展Western等实验，请根据实际需要加入蛋白Loading Buffer(可选用本公司《SDS-PAGE蛋白上样缓冲溶液(5×)》(货号B008)、《SDS-PAGE蛋白上样缓冲溶液(6×)》(货号B009)、《Laemmli上样缓冲液(2×)》(货号B010))并完成蛋白变性过程。

7. 由于部分物种组蛋白含量较少，可选用本公司《BCA微量蛋白浓度测定试剂盒》(货号B011)进行蛋白浓度测定。

8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

Version 2023020701