货号:C001
规格:50mL
产品简介及说明:
1. 外泌体是含有RNA和蛋白质的小囊泡(50-200nm),它们是由各种类型的细胞在培养过程中分泌的,并在血液、唾液、尿液和母乳等体液中大量存在。外泌体被认为是特定细胞间效应物及信号大分子传递的信使,然而,它们的形成、组成成分以及所参与的生物学过程仍不完全清楚。
2. 对外泌体功能和转运机制的生物学研究需要提取完整的外泌体,但目前使用的提取方法复杂繁琐,且特异性不高。沉淀法细胞外泌体提取试剂盒(PEG法)提供了一种简单可靠的方法从细胞培养基样品中提取完整的外泌体。通过试剂盒中的提取试剂锁住样品中的水分子,使溶解度较低的组分(即外泌体)从溶液中分离出来,使其能够在短暂的低速离心后收集。
试剂盒清单:
产品名称 | 包装 | 储存条件 |
沉淀法细胞外泌体提取试剂 | 50mL | 2-8°C |
保存条件:2-8°C保存,有效期12个月。
使用说明:
1. 准备样品
a. 收集细胞培养基。
b. 细胞培养基在2000×g下离心30min,去除细胞和碎片。
c. 转移无细胞培养基的上清液到新的试管中,切勿搅动沉淀。
2. 提取外泌体
a. 将所需体积的无细胞培养基转移到一个新的试管中,并加入0.5倍体积的沉淀法细胞外泌体提取试剂。
培养基 | 试剂 |
1mL | 500μL |
10mL | 5mL |
b. 通过涡旋或上下吹打将培养基/试剂混合均匀,直至形成均质溶液。
c. 样品置于2-8°C孵育过夜。
d. 孵育结束后,样品于2-8°C,10000×g离心1h。
e. 吸弃上清液,试管底部的沉淀即为外泌体(大多数情况下不可见)。
f. 用适量的1×PBS缓冲液或类似缓冲液重悬沉淀物。
初始细胞培养液体积 | 重悬体积 |
1mL | 25-100μL |
10mL | 100-1000μL |
g. 沉淀物悬浮后,用0.2μm或0.22μmm滤头(自备)过滤,所得外泌体即可用于下游分析实验或通过亲和法做进一步纯化。
h. 提取的外泌体在2-8°C条件下可保存1周,在≤20°C条件下可长期保存。
注意事项:
1. 为了确保所分离的外泌体来源于您感兴趣的细胞,建议使用无外泌体胎牛血清(FBS)培养细胞,否则会导致所收集的细胞来源外泌体掺入胎牛血清外泌体,出现污染现象。若无法获得无外泌体胎牛血清,一些细胞系也可采用无血清培养的方式培养12h,即可避免外泌体污染现象。
2. 本产品仅供研究使用。不适用于人类或动物的治疗或诊断用途。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Version 2023072801
- 在下方表单 填写需求描述给我们
- 点击右侧"在线咨询” 工具快速咨询
- 拨打免费电话: 15617717369
- 发送邮件至邮箱: chromatincl@163.com