多克隆/单克隆基因敲除稳转株构建
Cas9/gRNA复合物可在靶位点进行切割,产生双链断裂(DSB:Double-strand break),迫使细胞进行紧急修复。通常条件下,细胞偏向于使用非同源末端连接(NHEJ:nonhomologous DNA end joining)的方式对断裂的双链进行修复,进而造成靶位点基因的插入/缺失突变。科莫特使用CRISPR技术将靶细胞改造,获得单克隆或多克隆稳转细胞株。
Cas9/gRNA复合物可在靶位点进行切割,产生双链断裂(DSB:Double-strand break),迫使细胞进行紧急修复。通常条件下,细胞偏向于使用非同源末端连接(NHEJ:nonhomologous DNA end joining)的方式对断裂的双链进行修复,进而造成靶位点基因的插入/缺失突变。科莫特使用CRISPR技术将靶细胞改造,获得单克隆或多克隆稳转细胞株。